实时荧光PCR技术

　　本书系统阐述了实时荧光PCR技术的基础理论和临床检测方法，共25章。包括实时荧光PCR技术的基本原理和方法，PCR技术的基本原理和方法，PCR实验室设计与质量管理，检验标本的采集、运送、保存及核酸提取，PCR测定数据处理，PCR检验仪器设备，检验质量保证，病毒核酸检测的标准物质，以及各型肝炎病毒、人免疫缺陷病毒-1、人乳头瘤病毒、巨细胞病毒、冠状病毒、EB病毒、流感病毒、沙眼衣原体、结核杆菌、淋病奈瑟菌、幽门螺杆菌、肺炎衣原体、刚地弓形虫、解支原体等实时荧光PCR检测的标本采集与处理、引物和探针设计及临床意义。本书资料翔实、新颖，实用性、指导性强，是从事临床疫病研究、诊治的重要参考书，适合临床检验专业技术人员、各级临床医师和医学院校师生阅读参考，也可作为推广应用此项技术的培训教材。

　　李金明，男，1 963年2月出生。医学博士，卫生部临床检验中心临床免疫室主任、研究员，中国协和医科大学博士研究生导师。负责全国医院和血站实验室感染性疾病临床免疫和PCR检验，以及自身抗体免疫检验室间质量评价工作。近年来，较为系统地提出了临床分子诊断实验室质量管理、检测质量保证及标准化的概念和方法，推动了全国临床基因扩增检验实验室及人员培训I的规范化；率先在国内开展临床核酸检验的质量控制和标准化工作，于2005年和2006年分别获得我国第1个病毒核酸检验国家二级和一级标准物质。研究方向为：临床分子诊断方法及质量控制。以项目负责人承担国家自然科学基金课题两项，首都医学发展科研基金课题一项。以分课题负责人承担欧盟第六框架计划（FP6）国际合作研究项目一项，参与国家“十五”科技攻关课题三项。学术兼职：全国医学计量技术委员会委员，中国计量测试学会国家标准物质委员会委员，中国输血协会专家委员会成员，中华医学会检验分会传染病学组和免疫学组专家委员会委员，中国医疗装备协会专家库专家，《中华检验医学杂志》、《中国输血杂志》、《临床肝胆病杂志》和《中国医药导刊>等期刊编委，中南大学湘雅医学院兼职教授。在学术期刊上以第一作者和通讯作者发表论文80余篇。编著及主编《临床酶免疫测定技术》（人民军医出版社，2005）、《临床基因扩增检验技术》（人民卫生出版社，2002）和《全国临床检验操作规程》第3版（东南大学出版社，2006，临床基因和核酸检验篇），参与编写其他专著和教材十余部。所主持和主要参与的项目分获2001年和2003年北京市科技进步三等奖。2006年获国务院政府特殊津贴。

第1章　临床PCR技术的发展历史及趋势　第一节　PCR的起源和耐热DNA聚合酶的应用　　一、PCR的起源　　二、耐热DNA聚合酶的应用　第二节　PCR的基本原理　第三节　PCR的反应动力学　第四节　PCR扩增体系和扩增条件　　一、PCR扩增体系　　二、PCR扩增条件　　三、PCR扩增结果分析　第五节　PCR的主要特点与发展情况　　一、主要特点　　二、发展情况第2章　实时荧光PCR技术的发展历程、基本原理和方法　第一节　发展历程　第二节　基本原理　　一、PCR扩增的理论模式　　二、实时荧光PCR的理论基础　　三、TaqMan实时荧光PCR的基本原理　　四、双链DNA交联荧光染料实时荧光PCR的基本原理　　五、双杂交探针实时荧光PCR的基本原理　　六、分子信标实时荧光PCR的基本原理　　七、蝎形探针实时荧光PCR的基本原理　　八、数字实时荧光PCR的基本原理　第三节　引物和探针的特点　　一、引物特点　　二、探针特点第3章　临床PCR实验室的设计及质量管理体系的建立　第一节　临床PCR实验室的标本接收及分区规划设计　　一、标本接收要求　　二、实验室分区设计原则及工作流程　第二节　实验室质量管理体系的建立　　一、实验室质量管理概述　　二、实验室质量管理的特点　　三、质量体系文件的特性、作用与编写　第三节　实验室记录管理　　一、记录的种类　　二、记录的标志　　三、记录填写要求　　四、记录的封面和目录　　五、记录保存与管理　第四节　实验室认可与验收第4章　PCR检验标本的采集、运送、保存及核酸提取　第一节　标本采集、运送与保存　第二节　常见标本的处理和保存　第三节　标本中PCR抑制物　第四节　核酸提取方法第5章　实时荧光PCR测定的数据处理　第一节　基本概念　第二节　实时荧光PCR外标绝对定量的数学模型　第三节　实时荧光PCR相对定量数学模型　第四节　用曲线拟合的方法进行数据处理第6章　实时荧光PCR仪及其发展　第一节　PCR仪的发展历史及基本原理　第二节　实时荧光PCR仪简介　第三节　实时荧光PCR仪选择　第四节　实时荧光PCR仪的使用与维护第7章　临床PCR检验仪器设备　第一节　天平　第二节　离心机　第三节　微量加样器第8章　PCR检验的质量保证　第一节　概述　第二节　测定前质量控制　第三节　核酸样本分离纯化与质量控制　第四节　统计学质量控制　第五节　室间质量评价第9章　病毒核酸检测的标准物质　第一节　概述　第二节　检测用标准物质的制备第10章　甲型肝炎病毒实时荧光PCR检测第11章　乙型肝炎病毒实时荧光PCR检测　第一节　非变异乙型肝炎病毒检测　第二节　变异乙型肝炎病毒检测　第三节　HBV cccDNA的检测　第四节　HBV基因型的检测 第五节　HBVRNA检测 第六节　HBV全基因组测定第12章　丙型肝炎病毒实时荧光RT-PCR检测　第一节　丙型肝炎病毒检测　第二节　丙型肝炎病毒基因分型检测第13章　人免疫缺陷病毒-1实时荧光RT-PCR检测第14章　人乳头瘤病毒实时荧光PCR检测第15章　巨细胞病毒实时荧光PCR检测第16章　严重急性呼吸综合征冠状病毒实时荧光RT-PCR检测第17章　EB病毒实时荧光PCR检测第18章　流感病毒实时荧光RT-PCR检测第19章　沙眼衣原体实时荧光PCR检测第20章　结核杆菌实时荧光PCR检测第21章　淋病奈瑟菌实时荧光PCR检测第22章　幽门螺杆菌实时荧光PCR检测第23章　肺炎支原体实时荧光PCR检测第24章　刚地弓形虫实时荧光PCR检测第25章　解脲支原体实时荧光PCR检测