医学基础研究技术

　　本教材系统性介绍了分子生物学、细胞培养与现代组织形态学的基本技术与研究方法，强调整合性实验技术指导的基本风格和主要内容。本教材以“分子—细胞—组织”的顺序，按学科特点分为三篇，共十三章内容。 篇从分子水平重点介绍核酸、蛋白质的分离纯化与分析技术、酶学研究技术，以及基因工程；第二篇从细胞水平主要介绍细胞培养基本技术、培养细胞的活性与细胞功能检测技术、干细胞与干细胞培养及细胞工程；第三篇介绍现代组织形态学研究技术及应用，包括组织制片、组织化学和细胞化学与免疫组织化学技术及组织形态学的分析技术及其应用。以全面培养研究生创新性思维与实践技能为目标，每篇均引入基础性、实用性、代表性的经典实验方案及操作要点分析。本教材立足基础研究、跟踪 技术新进展，语言流畅、条理清晰、图文并茂。

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绪论
节 医学基础研究技术的主要内容
第二节 医学基础研究技术的发展简史
篇 分子生物学技术及应用
章 核酸的制备及质量鉴定方法
节 DNA的分离纯化
第二节 组织细胞总RNA的提取
第三节 核酸的定性定量与鉴定分析
实验1.1 真核组织/细胞基因组DNA提取及鉴定
实验1.2 TRIzol试剂法提取组织细胞总RNA及鉴定
第二章 核酸结构与功能研究的分析技术
节 核酸分子杂交、DNA芯片技术与DNA测序
第二节 聚合酶链反应与定点诱变
第三节 基因结构研究的技术策略
第四节 基因表达与功能研究的技术策略
第五节 表观遗传学研究技术
实验2.1 PCR扩增目的基因
实验2.2 实时荧光定量PCR分析目的基因mRNA表达水平
第三章 蛋白质的分离纯化与分析技术
节 蛋白质的分离纯化与鉴定技术
第二节 蛋白质的结构与功能分析技术
第三节 蛋白质组学研究与新技术应用
实验3.1 血清白蛋白、γ球蛋白的分离纯化与鉴定
实验3.2 蛋白质印迹法对组织中特定蛋白质的定性定量分析
实验3.3 蛋白质的双向电泳
实验3.4 免疫共沉淀检测蛋白质-蛋白质相互作用
第四章 酶学研究技术
节 酶的基本研究方法
第二节 酶法分析
第三节 酶在医学上的应用
实验4.1 乳酸脱氢酶的活性测定及组织同工酶谱分析
实验4.2 碱性磷酸酶的分离纯化及酶的比活性测定
实验4.3 酶法分析对特定物质的定量分析
第五章 基因工程
节 基因工程的技术路线
第二节 基因工程技术与医学发展
实验5.1 目的基因cDNA重组质粒的分子克隆
实验5.2 工程菌外源融合蛋白的诱导表达、分离纯化及鉴定
第二篇 细胞培养技术及应用
第六章 细胞培养基本技术
节 细胞培养的基本条件
第二节 培养细胞的基本技术
第三节 细胞共培养
实验6.1 小鼠腹腔巨噬细胞的原代培养
实验6.2 HepG2肝细胞系的传代培养
第七章 培养细胞的活性与细胞功能检测技术
节 培养细胞的形态学观察
第二节 培养细胞的生长与增殖特点
第三节 培养细胞的检测分析技术
实验7.1 MTT法检测细胞增殖与活性状态
实验7.2 流式细胞术检测细胞凋亡
实验7.3 HepG2肝细胞转染EGFPCD36及CD36定位观察
第八章 干细胞与干细胞培养
节 干细胞的分类与特点
第二节 干细胞的分离培养与鉴定
第三节 干细胞的分化诱导
第四节 干细胞在医学中的应用
实验8.1 鼠源性干细胞的分离与培养
第九章 细胞工程
节 细胞工程的研究基本技术
第二节 细胞工程的医学应用
第三篇 现代组织形态学研究技术及应用
第十章 组织制片技术
节 组织制片技术的种类
第二节 组织制片的基本流程
第三节 组织学特殊标本的制作
实验10.1 HE染色观察组织细胞形态
第十一章 组织化学和细胞化学技术
节 酶类的组织化学技术
第二节 脂质的组织化学技术
第三节 多糖类的组织化学技术
第四节 核酸的组织化学技术
实验11.1 油红O染色观察组织细胞脂质分布
第十二章 免疫组织化学技术
节 免疫组织化学技术的原理与分类
第二节 免疫组织化学技术的基本条件
第三节 免疫组织化学技术的基本流程
第四节 免疫组织化学结果分析及其应用
实验12.1 S-P法检测裸鼠大肠癌组织中细胞靶分子的表达
第十三章 组织形态学的分析技术
节 显微镜技术
第二节 组织学研究的定量分析技术
参考文献
索引
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