药学分子生物学技术指南

　　本书是一本简明实用且与目前高等学校分子生物学实验教学相适应的实验指导用书。全书分为两篇， 篇简明介绍了分子生物学的实验方法和理论;第二篇选编了18个学生实验，包括感受态细胞的制备和转化，质粒DNA的提取和分析，琼脂糖凝胶电泳检测DNA，PCR基因扩增，DNA重组，动物、植物、大肠杆菌基因组DNA的分离和分析，DNA序列测定，基因表达和检测，蛋白质印迹，植物总RNA的提取，定点突变，RT-PCR，差异显示mRNA，Southern杂交等内容。

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第1章 核酸的提取、纯化与定量
实验1.1 CTAB法制备中药材山茱萸基因组DNA
实验1.2 碱裂解法制备绿色荧光蛋白表达质粒pEGFR
实验1.3 DNA的纯化
实验1.4 玉米叶片总RNA的提取
实验1.5 非编码小RNA的设计、制备
实验1.6 核酸的定量
第2章 基因重组与转移技术
实验2.1 HindⅢ单酶切pEGFP
实验2.2 克隆LSD1基因部分片段连入T载体
实验2.3 大肠杆菌DHSα感受态的制备
实验2.4 绿色荧光蛋白表达载体pEGFR-C1转化大肠杆菌DH5a
实验2.5 阳离子脂质体介导绿色荧光蛋白表达载体pEGFR-C1转染HMMC细胞
实验2.6 利用Cas9技术慢病毒敲除哺乳动物细胞LSD1基因、
第3章 蛋白的提取、纯化与定量
实验3.1 中药决明子中蛋白质的提取分离
实验3.2 用乳糖作为诱导剂进行重组蛋白的表达
实验3.3 大肠杆菌中重组肠激酶的复性
实验3.4 利用蛋白纯化仪从大肠杆菌中亲和纯化LSD1重组蛋白
实验3.5 蛋白质的定性
实验3.6 蛋白质的定量第4章 凝胶电泳
实验4.1 琼脂糖凝胶电泳法检测SARS-CoV
实验4.2 血清差异蛋白的SDS-PAGE
实验4.3 华根霉液态发酵菌体形态差异蛋白质双向电泳分析
实验4.4 哈蟆油抗疲劳活性蛋白的SDS-PAGE凝胶成像分析第5章 PCR
实验5.1 基于real-time PCR技术考察安定对缺血缺氧新生大鼠KCC2mRNA表达的影响
实验5.2 基于PCR技术的食管鳞癌细胞中GAPDH基因的扩增
实验5.3 基于RT-PCR技术的药物对食管鳞癌细胞EC9706中p70S6K基因表达的影响分析
第6章 DNA分子标记
实验6.1 淫羊藿属植物PCR-RFLP遗传多样性分析
实验6.2 基于PCR-RFLP的川贝母药材的分子鉴定
实验6.3 女贞RAPD-PCR 实验条件优化
实验6.4 RAPD技术筛选麦冬分子鉴定标记
实验6.5 天麻AFLP反应体系的建立和优化
实验6．6 肉苁蓉种质资源多样性的AFLP分析
实验6．7 三角叶黄连IssR反应体系的建立与优化
实验6.8 采用ISSR标记分析草珊瑚DNA指纹图谱与其品质相关性
实验6.9 黄花蒿SRAP-PCR 反应体系的建立与优化
实验6.10 不同产地蒙古黄芪遗传关系的SRAP分析
实验6.11 SNP测定结合芯片电泳法快速鉴别人参和西洋参
实验6.12 SNP鉴别东方泽泻、泽泻及市售泽泻药材
实验6.13 溪黄草DNA条形码鉴定研究
实验6.14 黄芩及其同属近缘种的DNA条形码鉴定研究
第7章 分子杂交
实验7.1 基于Westerm blot技术考察JD诱导EC109细胞凋亡蛋白Bax,Bel-2的表达变化
实验7.2 Northerm印迹技木考祭个回浓度17β-雌二醇对成骨细胞中BMPR-IAmRNA表达的影响
实验7.3 基于Southern blot 技术考察拉米夫定对细胞内HBV DNA 的抑制分析
第8章 免疫技术
实验8.1 基于免疫组化技术考察5-Fu诱导EC109裸鼠移植瘤肿瘤细胞凋亡变化MRNA
实验8.6 抗EGFRvⅢ单克隆抗体制备