海洋酶工程实验教程

　　本书作为《海洋酶工程》课程的配套实验教材，针对《海洋酶工程》课程中所涉及的相关实验如产酶微生物的筛选、鉴定、酶基因克隆、异源表达和纯化、酶的固定化、酶分子的改造等实验内容进行顺序编排，选取了各个知识点的经典实验进行编写。书中内容涵盖了海洋酶工程研究整个过程的始终，从海洋微生物的筛选、分离、纯化、鉴定到基因组的提取、目标基因的克隆、表达、纯化、性质表征和产物分析。此外，还补充了海洋宏基因组文库的构建、野生型酶的纯化以及酶固定化等内容，以及酶工程下游产物的分离纯化及活性评价等内容。

　　朱本伟副教授一直致力于新型海洋多糖水解酶的挖掘及其结构与功能研究，研究工作主要集中在开发新型海洋多糖水解酶方面，并利用酶法等生物方法将天然碳水化合物资源转化为功能食品或功能产品，重点研究如何绿色高效地从多糖降解制备得到寡糖；进而对此过程中重要的海洋酶进行发现、创制、改造及机制研究并取得了较好的研究成果。

实验室安全须知 ( １ )
实验一　 普通光学显微镜的使用 ( ２ )
实验二　 玻璃器皿的清洗、 包扎和干热灭菌 ( ９ )
实验三　 培养基的制备与高压蒸汽灭菌 ( １３ )
实验四　 海洋微生物的接种、 分离及无菌操作 ( １７ )
实验五　 海洋细菌的简单染色技术 ( ２４ )
实验六　 海洋细菌的革兰氏染色技术 ( ２７ )
实验七　 海洋细菌的芽孢染色技术 ( ３０ )
实验八　 海洋细菌的荚膜染色技术 ( ３２ )
实验九　 海洋细菌的鞭毛染色技术 ( ３４ )
实验十　 海洋放线菌的观察 ( ３６ )
实验十一　 海洋酵母菌的观察 ( ３８ )
实验十二　 海洋霉菌的观察 ( ４０ )
实验十三　 海洋细菌的平板菌落计数法 ( ４４ )
实验十四　 海洋细菌生长曲线的测定 ( ４７ )
实验十五　 海洋细菌的生理生化反应 ( ４９ )
实验十六　 海洋细菌的分离及鉴定 ( ５３ )
实验十七　 海洋细菌基因组 ＤＮＡ 的提取 ( ５５ )
实验十八　 海洋酵母菌的分离及鉴定 ( ５７ )
实验十九　 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白相对分子质量 ( ５９ )
实验二十　 Ｆｏｌｉｎ－酚试剂法(Ｌｏｗｒｙ 法)测定蛋白浓度 ( ６２ )
实验二十一　 尺寸排阻色谱分离纯化几丁质酶 ( ６４ )
实验二十二　 果胶酶的包涵体复性 ( ６６ )
实验二十三　 海洋宏基因组文库构建及目标基因筛选 ( ６８ )
实验二十四　 褐藻胶裂解酶编码基因重组质粒的转化 ( ７１ )
实验二十五　 褐藻胶裂解酶重组质粒诱导表达及纯化 ( ７３ )
实验二十六　 褐藻胶裂解酶活性测定及酶动力学参数测定 ( ７６ )
实验二十七　 褐藻胶裂解酶的酶学性质表征 ( ７８ )
实验二十八　 褐藻胶裂解酶产物分析 ( ８０ )
实验二十九　 壳聚糖酶重组质粒转化 ( ８２ )
实验三十　 壳聚糖酶重组质粒诱导表达及纯化 ( ８４ )
实验三十一　 壳聚糖酶活性测定及酶动力学参数测定 ( ８７ )
实验三十二　 壳聚糖酶的酶学性质表征 ( ８９ )
实验三十三　 壳聚糖酶的产物分析 ( ９１ )
实验三十四　 κ－卡拉胶酶重组质粒的转化 ( ９３ )
实验三十五　 κ－卡拉胶酶重组质粒的诱导表达 ( ９５ )
实验三十六　 κ－卡拉胶酶的磁珠纯化 ( ９７ )
实验三十七　 κ－卡拉胶酶的酶学性质表征 (１００)
实验三十八　 κ－卡拉胶酶的降解产物分析 (１０２)
实验三十九　 石莼多糖裂解酶重组质粒转化 (１０４)
实验四十　 石莼多糖裂解酶重组质粒异源表达及纯化 (１０６)
实验四十一　 石莼多糖裂解酶活性测定及酶动力学参数测定 (１０９)
实验四十二　 石莼多糖裂解酶酶学性质表征 (１１１)
实验四十三　 石莼多糖裂解酶降解产物分析 (１１３)
实验四十四　 重组果胶酶的固定化 (１１５)
实验四十五　 卡拉胶寡糖的活性评价 (１１７)
附录 (１２０)
　 　 附录１　 微生物常用培养基配方 (１２０)
　 　 附录２　 微生物染色常用染液配方 (１４９)
　 　 附录３　 海洋产酶微生物筛选常用方法 (１５０)
　 　 附录４　 无菌操作基本要求和超净工作台的使用管理 (１５６)
　 　 附录５　 超净工作台的使用管理 (１５７)
参考文献 (１５８)