海洋贝类免疫学实验技术

　　本书介绍了海洋贝类免疫学基础及其实验技术特点，在此基础上，以扇贝、牡蛎为例，展开论述了海洋贝类实验材料、免疫刺激和样本收集；基于核酸的实验方法（包括基于蛋白酶K法的海洋动物基因组DNA制备等）；阐述了基于蛋白质的实验方法（包含原核重组表达系统的选择等）；接下来论述了免疫组化相关实验方法（包括血淋巴细胞滴片及组织石蜡切片的制备等）；阐述了免疫活性相关实验方法（包括□□**活性测定等）；论述了免疫指标相关实验方法（包括基于FITC荧光法测定细胞吞噬活性等）；最后阐述了基于细胞的相关实验方法（包括基于Leiboviz'sL-15培养基的贝类原代细胞培养等）。本书适用于水生动物医学、水产养殖学、水族科学与技术、动物医学、海洋生物学、海洋渔业科学与技术、动物检疫等专业师生使用，也可供水产科研单位、渔业生产部门的科研与技术人员参考。

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前言
第一章 海洋贝类实验材料、免疫刺激和样本收集
第一节 扇贝的暂养、饲喂、免疫刺激及样品采集方法
第二节 牡蛎的暂养、饲喂、免疫刺激及样品采集方法
第二章 基于核酸的实验方法
第一节 基于蛋白酶K法的海洋贝类基因组DNA制备
第二节 基于Trizol类试剂的海洋贝类总RNA提取
第三节 核酸的琼脂糖凝胶电泳
第四节 用于qPCR和RACE的cDNA合成及加尾反应
第五节 常规PCR技术和RACE技术
第六节 基于SYBR Green的实时荧光定量PCR技术
参考文献
第三章 基于蛋白质的实验方法
第一节 原核重组表达系统的选择
第二节 重组质粒的构建
第三节 基于IPTG的原核表达
第四节 GST标签蛋白纯化
第五节 His标签蛋白的□性纯化（镍琼脂糖凝胶FF柱）
第六节 His标签蛋白非□性纯化
第七节 MBP标签蛋白纯化
第八节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳
第九节 蛋白质的透析复性
第十节 基于BCA法的蛋白浓度测定
第十一节 基于Bradford法的蛋白浓度测定
第十二节 小鼠多克隆抗体制备
第十三节 免疫印迹法
第十四节 凝胶迁移实验
参考文献
第四章 免疫组化相关实验方法
第一节 血淋巴细胞滴片及组织石蜡切片的制备
第二节 基于血淋巴细胞滴片及组织石蜡切片的免疫荧光技术
第三节 扇贝和牡蛎胚胎整体免疫荧光
参考文献
第五章 免疫活性相关实验方法
第一节 □□□□活性测定
第二节 凝菌活性测定及其抑制实验
第三节 凝血活性测定
第四节 细胞包囊化活性测定
第五节 基于ELISA的PAMPs结合活性测定
第六节 RNA干扰技术
参考文献
第六章 免疫指标相关实验方法
第一节 基于FITC荧光法测定细胞吞噬活性
第二节 细胞凋亡水平检测
第三节 新生循环血细胞数目检测
第四节 一氧化氮合成酶活性测定
第五节 总一氧化氮含量测定
第六节 酚氧化酶活性测定
参考文献
第七章 基于细胞的相关实验方法
第一节 基于Leiboviz's L-15培养基的贝类原代细胞培养
第二节 哺乳动物细胞传代培养
第三节 哺乳动物细胞瞬时转染
第四节 报告基因表达实验
第五节 基于DAPI/Hochest 33258的细胞核染色
第六节 基于DiI的细胞膜染色
参考文献