医学生物化学与分子生物学实验指导

　　本书共分五篇。第一篇是生物化学基本技术及应用，包括四种基本技术的原理、应用及使用方法，使学生初步掌握实验技术和实验技能，同时加强实验室安全及防范意识；第二篇是各种物质的生化测定，突出定量分析和综合性实验，使学生了解生物体内基本物质成分的分离、分析的鉴定常用方法以及物质代谢的研究方法，并通过实验技术加深对理论知识的理解，增强分析问题和解决问题的能力；第三篇是分子生物学实验原理与基本技术，介绍了分子生物学最基本的实验技术，了解DNA提取、基因工程和基因表达研究技术；第四篇是设计性实验，进一步培养学生的综合应用能力、分析能力和设计能力；第五篇为附录，可供查阅有关资料和数据。

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第一篇 生物化学基本技术及应用
第一章 生物化学实验常识
一、实验室规则及常识
二、实验室安全及防护知识
三、实验记录及实验报告
四、实验室基本操作
第二章 基本技术及应用
一、分光光度技术
二、电泳技术
三、离心技术
四、层析技术
第二篇 各种物质的生化测定
第三章 氨基酸、蛋白质
实验一 氨基酸纸上层析
实验二 蛋白质两性电离和等电点的测定
实验三 酪蛋白的提取
实验四 总氮量的测定——凯氏定氮法
实验五 血清总蛋白测定——双缩脲法
实验六 血清白蛋白测定——溴甲酚绿法
实验七 蛋白质含量测定——紫外分光光度法
实验八 血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
习题
第四章 酶类
实验九 温度、pH、激动剂及抑制剂对酶促反应速度的影响
实验十 底物浓度对酶促反应的影响——脲酶Km值测定
实验十一 血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定——改良赖氏法
实验十二 血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)测定
实验十三 血清乳酸脱氢酶(LDH)活性测定
实验十四 α-羟丁酸脱氢酶活性测定——连续监测法测定
习题
第五章 糖代谢
实验十五 总糖和还原糖含量测定——蒽酮比色法
实验十六 总糖和还原糖含量测定——斐林比色法
实验十七 血糖浓度测定——邻甲苯胺法
实验十八 血糖浓度测定——葡萄糖氧化酶法
习题
第六章 脂类代谢
实验十九 脂肪酸的β-氧化
实验二十 血清总胆固醇(TC)测定(CE-COD-POD法)
实验二十一 血清甘油三酯(TG)测定(CK-GPO-POD法)
实验二十二 血清高密度脂蛋白一胆固醇测定(直接法-选择抑制法)
习题
第七章 含氮化合物
实验二十三 血清尿素测定——脲酶波氏法
实验二十四 血清肌酐测定——碱性苦味酸法
习题
第八章 核酸
实验二十五 核酸的提取、水解与鉴定
实验二十六 核酸含量测定——紫外吸收法
实验二十七 核酸含量测定——定磷法
习题
第九章 肝的生物化学
实验二十八 肝生酮作用及酮体的检出
实验二十九 血清总胆红素测定——重氮法
实验三十 血清直接胆红素测定——重氮法
习颢
第十章 维生素类
实验三十一 维生素C含量测定——2，6-二氯酚靛酚法
实验三十二 维生素B2含量测定——荧光法
习题
第十一章 综合实验
实验三十三 血清γ-球蛋白的分离纯化及鉴定
实验三十四 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳(CAME)
实验三十五 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量
实验三十六 胰岛素与肾上腺素对血糖浓度的影响
实验三十七 凝胶层析分离混合物
第三篇 分子生物学实验原理与基本技术
第十二章 基因工程基本技术
实验三十八 大肠杆菌感受态细胞的制备、转化
实验三十九 质粒DNA的提取
实验四十 外周血DNA的提取与鉴定
实验四十一 DNA琼脂糖凝胶电泳
实验四十二 PCR扩增DNA
实验四十三 目的基因与载体的限制性双酶切
实验四十四 逆转录PCR(RT—PCR)
实验四十五 真核细胞总RNA的制备(异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法)
实验四十六 Southern印迹
实验四十七 DNA的重组技术
实验四十八 实时荧光定量PCR
实验四十九 Western blot检测目标蛋白的表达
习题
第四篇 设计性实验
第十三章 设计性实验
实验五十 淀粉酶最适催化条件选择
实验五十一 植物总糖和还原糖含量测定的实验设计
实验五十二 水果、蔬菜中维生素C含量测定的实验设计
实验五十三 牛乳中酪蛋白制备的实验设计
实验五十四 中药对家兔实验性高脂血症影响的实验设计
实验五十五 TBL教学法的实施方案
第五篇 附录
附录一 部分试剂与溶剂的纯化
附录二 常用试剂的配制
附录三 市售常用酸、碱的浓度
附录四 一般化学试剂的分级
附录五 常用缓冲溶液的配制方法
附录六 临床生化常用单位换算表
附录七 临床生化检验项目及参考值
附录八 希腊字母表
附录九 元素原子量表