书籍详情
PCR最新技术原理、方法及应用（第三版）
作者：王恒樑 编
出版社：化学工业出版社
出版时间：2021-10-01
ISBN：9787122387356
定价：¥299.00
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内容简介
《PCR 技术原理、方法及应用（第三版）》系统介绍各种PCR技术及其在各个领域中的应用，涵盖了发展的技术。第三版对第二版进行了修订和补充。例如，在方法方面增加了恒温PCR，该方法可在一个温度下即可完成PCR，省略了昂贵的PCR仪，适用于现场作业；增加了微流控微滴数字PCR方法，该法的优点是使用的样本极少，定量比常规的实时荧光定量PCR更精确，而且敏度高。在应用方面，新版包括了在植物学、大家畜和水生动物方面的应用，以及在转基因动物方面的应用。 本书是关于PCR技术的全面实验手册，可供所有从事生命科学研究的科技工作者、教师和研究生阅读参考。
作者简介
王恒樑，军事科学院军事医学研究院生物工程研究所副所长、研究员，病原微生物生物安全国家重点实验室副主任，博士生导师。一直从事病原细菌致病机理和基因工程疫苗研究。曾获国家自然科学杰出青年基金、国务院政府特殊津贴、科协求是杰出青年奖、科技部和盖茨基金联合颁发首届“大挑战2015·青年科学家”，入选国家百千万人才工程，获“有突出贡献中青年专家”称号。
目录
第一章绪论001
第一节PCR发展简史001
第二节PCR技术的基本原理和操作002
一、PCR的基本原理002
二、PCR的基本成分002
三、PCR的基本操作005
第三节PCR的主要应用006
一、基础研究方面的应用006
二、临床上的应用007
三、在法医学中的应用008
四、在其它方面的应用008
参考文献009
第二章扩增已知序列两侧DNA的PCR011
第一节反向PCR011
一、引言011
二、基本原理011
三、材料012
四、方法013
五、注意事项014
六、应用015
七、小结017
第二节锚定PCR018
一、引言018
二、原理018
三、用连接锚定PCR从基因文库中扩增已知基因侧翼序列020
四、用互补锚定PCR直接扩增已知序列侧翼cDNA序列021
五、问题及对策025
六、小结026
第三节RACE——cDNA末端的快速扩增027
一、引言027
二、RACE基本原理028
三、实验方案030
四、RACE的应用033
五、小结034
第四节连接介导的PCR034
一、引言034
二、原理034
三、材料035
四、操作步骤035
五、注意事项038
六、应用039
七、小结042
第五节Bubble-PCR042
一、引言042
二、原理042
三、材料与方法043
四、注意事项044
五、应用045
六、小结045
参考文献045
第三章巢式PCR048
第一节常规巢式PCR048
一、引言048
二、原理048
三、材料049
四、方法049
五、注意事项050
六、应用与小结050
第二节半巢式PCR050
一、引言050
二、材料050
三、方法051
四、注意事项051
五、应用与小结052
第三节反转录巢式PCR052
一、引言052
二、材料052
三、方法052
四、注意事项054
五、应用054
第四节共有序列巢式PCR054
一、引言054
二、材料055
三、方法055
四、注意事项056
五、应用与小结056
第五节种特异巢式PCR056
一、引言056
二、材料057
三、方法057
四、注意事项058
五、应用与小结058
第六节巢式PCR-变性梯度凝胶电泳058
一、引言058
二、材料059
三、方法059
四、注意事项060
五、应用与小结060
第七节巢式PCR-限制性片段长度多态性061
一、引言061
二、材料061
三、方法062
四、注意事项063
五、应用与小结063
参考文献063
第四章实时荧光定量PCR065
第一节实时荧光定量PCR原理065
一、引言065
二、概念及原理065
第二节实时荧光定量PCR中的荧光化学物质067
一、引言067
二、荧光染料067
三、水解探针068
四、分子信标069
五、双杂交探针071
六、复合探针071
第三节实时荧光定量PCR的定量方法072
一、绝对定量072
二、相对定量073
第四节实时荧光定量PCR的实验方法076
一、实时荧光定量PCR076
二、实时定量RT-PCR079
三、多重实时定量PCR081
四、多重实时定量RT-PCR084
五、实验方案的优化086
六、实践中应注意的问题087
第五节实时荧光定量PCR技术的应用088
一、在病原体检测中的应用089
二、在肿瘤研究中的应用090
三、在基因表达研究中的应用092
四、在细胞因子表达分析中的应用092
五、在遗传学及SNP分析上的应用092
六、小结093
参考文献094
第五章致突变PCR097
第一节利用易错DNA聚合酶进行随机突变098
一、原理098
二、实验方案098
三、注意事项100
四、讨论100
五、应用101
第二节利用PCR引物构建位点特异突变体102
一、方法1：利用重叠延伸PCR构建定点突变体102
二、方法2：利用大引物PCR构建定点突变体105
三、方法3：利用重组PCR进行扫描突变107
四、讨论111
五、应用112
六、小结113
参考文献113
第六章测定基因突变的PCR115
第一节多重PCR115
一、引言115
二、原理116
三、材料116
四、方法116
五、常见问题的解决120
六、应用121
七、小结128
第二节常用的等位基因特异性PCR128
一、引言128
二、原理129
三、材料130
四、方法130
五、注意事项131
六、对等位基因特异PCR的改进131
七、应用与小结132
第三节简单等位基因辨别PCR133
一、引言133
二、原理133
三、材料134
四、方法135
五、注意事项136
六、应用与小结136
第四节L-DNA标记的等位基因特异性PCR136
一、引言136
二、原理137
三、材料137
四、方法138
五、注意事项139
六、应用与小结139
第五节同源一步荧光等位基因特异性PCR139
一、引言139
二、原理139
三、材料140
四、方法141
五、注意事项142
六、应用与小结142
第六节低温变性共扩增PCR142
一、引言142
二、原理143
三、材料144
四、方法144
五、小结145
第七节限制性片段长度多态性PCR145
一、原理145
二、材料145
三、操作方法146
四、注意事项147
五、应用148
第八节PCR-变性梯度凝胶电泳149
一、原理149
二、材料149
三、操作方法149
四、注意事项151
五、应用151
参考文献152
第一节PCR发展简史001
第二节PCR技术的基本原理和操作002
一、PCR的基本原理002
二、PCR的基本成分002
三、PCR的基本操作005
第三节PCR的主要应用006
一、基础研究方面的应用006
二、临床上的应用007
三、在法医学中的应用008
四、在其它方面的应用008
参考文献009
第二章扩增已知序列两侧DNA的PCR011
第一节反向PCR011
一、引言011
二、基本原理011
三、材料012
四、方法013
五、注意事项014
六、应用015
七、小结017
第二节锚定PCR018
一、引言018
二、原理018
三、用连接锚定PCR从基因文库中扩增已知基因侧翼序列020
四、用互补锚定PCR直接扩增已知序列侧翼cDNA序列021
五、问题及对策025
六、小结026
第三节RACE——cDNA末端的快速扩增027
一、引言027
二、RACE基本原理028
三、实验方案030
四、RACE的应用033
五、小结034
第四节连接介导的PCR034
一、引言034
二、原理034
三、材料035
四、操作步骤035
五、注意事项038
六、应用039
七、小结042
第五节Bubble-PCR042
一、引言042
二、原理042
三、材料与方法043
四、注意事项044
五、应用045
六、小结045
参考文献045
第三章巢式PCR048
第一节常规巢式PCR048
一、引言048
二、原理048
三、材料049
四、方法049
五、注意事项050
六、应用与小结050
第二节半巢式PCR050
一、引言050
二、材料050
三、方法051
四、注意事项051
五、应用与小结052
第三节反转录巢式PCR052
一、引言052
二、材料052
三、方法052
四、注意事项054
五、应用054
第四节共有序列巢式PCR054
一、引言054
二、材料055
三、方法055
四、注意事项056
五、应用与小结056
第五节种特异巢式PCR056
一、引言056
二、材料057
三、方法057
四、注意事项058
五、应用与小结058
第六节巢式PCR-变性梯度凝胶电泳058
一、引言058
二、材料059
三、方法059
四、注意事项060
五、应用与小结060
第七节巢式PCR-限制性片段长度多态性061
一、引言061
二、材料061
三、方法062
四、注意事项063
五、应用与小结063
参考文献063
第四章实时荧光定量PCR065
第一节实时荧光定量PCR原理065
一、引言065
二、概念及原理065
第二节实时荧光定量PCR中的荧光化学物质067
一、引言067
二、荧光染料067
三、水解探针068
四、分子信标069
五、双杂交探针071
六、复合探针071
第三节实时荧光定量PCR的定量方法072
一、绝对定量072
二、相对定量073
第四节实时荧光定量PCR的实验方法076
一、实时荧光定量PCR076
二、实时定量RT-PCR079
三、多重实时定量PCR081
四、多重实时定量RT-PCR084
五、实验方案的优化086
六、实践中应注意的问题087
第五节实时荧光定量PCR技术的应用088
一、在病原体检测中的应用089
二、在肿瘤研究中的应用090
三、在基因表达研究中的应用092
四、在细胞因子表达分析中的应用092
五、在遗传学及SNP分析上的应用092
六、小结093
参考文献094
第五章致突变PCR097
第一节利用易错DNA聚合酶进行随机突变098
一、原理098
二、实验方案098
三、注意事项100
四、讨论100
五、应用101
第二节利用PCR引物构建位点特异突变体102
一、方法1：利用重叠延伸PCR构建定点突变体102
二、方法2：利用大引物PCR构建定点突变体105
三、方法3：利用重组PCR进行扫描突变107
四、讨论111
五、应用112
六、小结113
参考文献113
第六章测定基因突变的PCR115
第一节多重PCR115
一、引言115
二、原理116
三、材料116
四、方法116
五、常见问题的解决120
六、应用121
七、小结128
第二节常用的等位基因特异性PCR128
一、引言128
二、原理129
三、材料130
四、方法130
五、注意事项131
六、对等位基因特异PCR的改进131
七、应用与小结132
第三节简单等位基因辨别PCR133
一、引言133
二、原理133
三、材料134
四、方法135
五、注意事项136
六、应用与小结136
第四节L-DNA标记的等位基因特异性PCR136
一、引言136
二、原理137
三、材料137
四、方法138
五、注意事项139
六、应用与小结139
第五节同源一步荧光等位基因特异性PCR139
一、引言139
二、原理139
三、材料140
四、方法141
五、注意事项142
六、应用与小结142
第六节低温变性共扩增PCR142
一、引言142
二、原理143
三、材料144
四、方法144
五、小结145
第七节限制性片段长度多态性PCR145
一、原理145
二、材料145
三、操作方法146
四、注意事项147
五、应用148
第八节PCR-变性梯度凝胶电泳149
一、原理149
二、材料149
三、操作方法149
四、注意事项151
五、应用151
参考文献152
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