植物苹果酸脱氢酶基因功能研究

　　苹果酸脱氢酶（Malate dehydrogenases，MDHs）是参与植物生命代谢的关键酶，广泛存在于各种植物体中。根据其辅酶及亚细胞位置的不同，苹果酸脱氢酶被分为多种亚型，主要包括线粒体苹果酸脱氢酶、细胞质苹果酸脱氢酶、质体苹果酸脱氢酶和过氧化酶体苹果酸脱氢酶等。由于发生在不同亚细胞器中的代谢活动不同，不同亚型的苹果酸脱氢酶各自具有其特异的功能。本书主要介绍了植物中苹果酸脱氢酶的结构、分类和酶学性质，以及各种亚型的苹果酸脱氢酶基因在不同植物中的功能。同时，作者根据自身研究结果重点阐述了苹果酸脱氢酶基因在大白菜中的功能及作用机制。

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前言
第一章 苹果酸脱氢酶的性质及功能
第一节 苹果酸脱氢酶的结构、分类及酶学性质的研究
第二节 植物中苹果酸脱氢酶基因的克隆及其功能的相关
研究
第二章 植物苹果酸脱氢酶与耐铝机制的研究
第一节 植物对铝的外部排斥机制
第二节 植物对铝的内部忍耐机制
第三节 植物MDHs与耐铝性的研究
第三章 苹果酸脱氢酶与植物的花发育
第一节 植物的花药发育
第二节 花药开裂的调控
第四章 大白菜苹果酸脱氢酶基因研究的必要性
第五章 大白菜苹果酸脱氢酶基因的亚细胞定位
第一节 试验材料
一、植物材料及载体
二、生化试剂
三、主要仪器
第二节 试验方法
一、亚细胞定位预测
二、亚细胞定位表达载体的构建
三、融合重组载体转入大肠杆菌
四、融合重组载体的检测
五、拟南芥原生质体的提取及转化
六、荧光显微镜的观察
第三节 结果与分析
一、亚细胞定位预测分析
二、重组载体的验证及其定位
第四节 本章 小结
第六章 BraChMDH在大白菜不同组织及铝盐胁迫下的
表达分析
第一节 试验材料
一、试验植物材料
二、生化试剂
三、主要仪器
第二节 试验方法
一、植物不同组织cDNA的获取
二、引物的合成
三、BraChMDH在大白菜不同组织中的表达分析
四、铝胁迫下大白菜叶片BraChMDH的表达变化
第三节 结果与分析
一、BraChMDH在大白菜92S24不同组织中的表达
模式
二、大白菜BraChMDH在铝胁迫后上调表达
第四节 本章 小结
第七章 BraChMDH基因在拟南芥中的超量表达
功能分析
第一节 试验材料
一、植物材料
二、菌株及质粒
三、生化试剂
四、主要仪器
第二节 试验方法
一、超量表达载体p2301-BraChMDH的构建
二、p2301-BraChMDH转入大肠杆菌DH5a
三、超量表达载体p2301-BraChMDH的检测
四、超量表达载体p2301-BraChMDH对拟南芥的遗传
转化
五、超量转基因拟南芥的筛选及PCR检测
六、BraChMDH在超量转基因拟南芥中的荧光定量
检测
七、超量转基因植株生长指标的测定
八、转基因植株的铝盐胁迫处理
九、拟南芥幼苗根系活力的测定
第三节 结果与分析
一、超量表达载体p2301-BraChMDH的构建
二、超量表达载体农杆菌检测
三、转基因植株抗性筛选及PCR检测
四、BraChMDH 在转基因拟南芥中的表达分析
五、BraChMDH超量表达导致拟南芥早抽墓
六、BraChMDH超量表达增强拟南芥生长势
七、BraChMDH超量表达增强拟南芥的耐铝性
第四节 本章 小结
第八章 BraChMDH基因在拟南芥中的干扰表达功能
分析
第一节 试验材料
一、植物材料
二、菌株及质粒
三、生化试剂
四、主要仪器
第二节 试验方法
一、干扰表达载体 pRNAi-LIC-BraChMDH的构建
二、干扰表达载体pRNAi-LIC-BraChMDH的检测
三、干扰表达载体pRNAi-LIC-BraChMDH对拟南芥的
遗传转化
四、干扰转基因植株的抗性筛选和PCR检测
五、干扰转基因拟南芥插入位点分析
六、干扰转基因拟南芥的荧光定量检测
七、干扰转基因拟南芥花粉活力的测定
八、干扰转基因拟南芥花器官的观察
九、外源JA处理
第三节 结果与分析
一、干扰表达载体pRNAi-LIC-BraChMDH的构建
二、干扰表达载体农杆菌检测
三、转基因植株抗性筛选及PCR检测
四、转基因植株插入位点分析
第四节 本章 小结
一、该不育表型与JA的关系
二、该不育表型与AtMYB26的关系
参考文献
附录
缩略词