药用植物组培快繁技术

　　《药用植物组培快繁技术》包括绪论和十二个项目，即药用植物组培快繁实验室规划设计，培养基及其配制，无菌技术，无菌培养体系的建立（初代培养），继代培养，壮苗生根培养与炼苗、移栽，组培苗工厂化生产，无毒苗生产技术，无糖培养及非试管快繁技术，药用植物细胞工程，药用植物组培快繁技术研发以及常用药用植物的组培快繁技术。通过学习，学生可独立完成植物组培室的设计及设备采购计划、药用植物的组织培养和快繁育苗工作，并且能设计培养基配方，进行药用植物组培苗生产技术研发工作。本书配有二维码数字资源（操作视频、文档、彩图），方便读者对药用植物组织培养知识的理解和进行核心操作技能的学习。 本教材可供高职高专院校中草药栽培、中药生产与加工、生物制药技术、生物技术以及设施农业等专业学生使用，也可作为药用植物组培苗生产企业的员工培训用书，还可供从事药用植物种苗生产行业和爱好中草药组织培养的读者参考使用。

　　莫小路，广东食品药品职业学院，教授，作者2000-2003年在中山大学植物学专业读博士，研究方向为植物发育与分子生物学，论文题目“银杏离体培养中的细胞分化与药用次生成分积累的研究”；2004年到广东食品药品职业学院及广东省中药研究所从事药用植物资源相关教学与科研工作，在岭南中草药的组培快繁方面积累了丰富的经验，主持和参与南药资源方面的省、市级科研项目多项，发表研究论文多篇。 作者是广东省组培产业联盟专家组成员，与广东省内外从事植物组织培养以及药用植物资源保护与开发利用的科研单位、生产企业都有工作联系和合作基础。从事高职教育十多年，熟知高职教育的培养人才目标和行业对技能型人才的需求， 是2008年国家精品课程和2013年国家精品资源共享课《药用植物识别技术》的课程负责人；2016年组建本校中药学院中药生产与加工专业，主要教授《药用植物组培快繁技术》《药用真菌生产技术》等课程，编写出版高职教材3本，主编校本教材1本。

绪论1
一、药用植物概述1
二、药用植物组织培养概述3
三、药用植物组培快繁技术教学设计5

模块一药用植物组织培养基础7
项目一药用植物组培快繁实验室规划设计7
【学习目标】7
【必备知识】7
一、组培快繁实验室规划设计的总体要求7
二、组培快繁实验室的组成及各部分的设计要求8
三、实验室常用仪器、器具的使用和维护养护11
【工作任务】17
任务1参观植物组培快繁实验室、设计组培快繁实验室的平面图17
案例1-1小型植物组织培养实验室设计18
案例1-2植物组培工厂设计19
【项目自测】20
项目二培养基及其配制21
【学习目标】21
【必备知识】21
一、培养基的作用21
二、培养基的成分21
三、培养基的特点和命名30
四、培养基的种类30
五、培养基的选择32
六、培养基的制备33
【工作任务】36
任务2-1MS培养基母液的配制36
任务2-2MS培养基的配制39
【项目自测】42
项目三无菌技术42
【学习目标】42
【必备知识】42
一、消毒与灭菌42
二、无菌环境控制方法43
三、无菌室空气污染状况的检查44
四、培养器皿、用具的清洗45
五、培养器皿、接种用具的灭菌46
六、培养基的灭菌47
七、植物材料的消毒、灭菌方法49
八、无菌操作49
【工作任务】50
任务3-1植物组培容器的洗涤与无菌水的制备50
任务3-2操作环境消毒及无菌操作51
【项目自测】53

模块二药用植物组织培养通用技术54
项目四无菌培养体系的建立（初代培养）54
【学习目标】54
【必备知识】54
一、外植体与外植体的初代培养54
二、外植体材料的类型和选择55
三、外植体的预处理56
四、外植体的消毒57
五、外植体接种和初代培养60
六、初代培养常见问题预防措施61
【工作任务】64
任务4茎叶外植体的灭菌与接种（初代培养）64
【项目自测】66
项目五继代培养66
【学习目标】66
【必备知识】67
一、继代培养67
二、继代培养常见问题及其解决措施71
【工作任务】74
任务5药用植物无菌苗的增殖培养74
【项目自测】75
项目六壮苗生根培养与炼苗、移栽75
【学习目标】75
【必备知识】76
一、组培苗的生根壮苗培养76
二、试管苗的移栽82
【工作任务】85
任务6组培苗的炼苗及移栽85
案例6何首乌组培苗的炼苗及移栽87
【项目自测】88

模块三药用植物组培苗工厂化生产89
项目七组培苗工厂化生产89
【学习目标】89
【必备知识】89
一、植物组织培养工厂构建与生产准备89
二、组培苗工厂化生产的技术路线和工艺流程95
三、组培苗工厂化生产96
四、组培苗质量控制101
五、组培苗生产计划103
六、组培苗的成本管理与经济效益概算106
【工作任务】107
任务7-1参观植物组培快繁工厂并做成本和效益概算方案107
任务7-2年产100万株组培苗工厂的生产规划设计108
【项目自测】110
【素质拓展】110
组培苗工厂的经营管理110
年产100万迷迭香组培苗技术方案110

模块四药用植物种苗快繁新技术及研发111
项目八无毒苗生产技术111
【学习目标】111
【必备知识】111
一、脱毒苗与植物脱毒培养112
二、无病毒植物的鉴定119
三、无病毒苗的保存和利用122
【工作任务】123
任务8药用植物微茎尖脱毒培养技术123
案例8怀山药茎尖脱毒技术125
【项目自测】125
项目九无糖培养及非试管快繁技术126
【学习目标】126
【必备知识】126
一、植物无糖培养技术126
二、植物非试管快繁技术131
【工作任务】137
任务9草珊瑚、牛大力的非试管快繁技术137
案例9-1桉树无糖培养技术138
案例9-2补血草/情人草无糖培养技术138
案例9-3小油桐非试管快繁技术139
【项目自测】139
项目十药用植物细胞工程139
【学习目标】139
【必备知识】140
一、植物细胞工程140
二、药用植物愈伤组织培养140
三、药用植物细胞悬浮培养142
四、药用植物单细胞培养144
五、药用植物器官培养145
【工作任务】149
任务10-1银杏种胚愈伤组织诱导培养149
任务10-2银杏细胞悬浮培养150
案例10-1银杏种胚细胞悬浮培养151
案例10-2广藿香叶片愈伤组织诱导培养152
案例10-3何首乌毛状根培养152
【项目自测】153
项目十一药用植物组培快繁技术研发154
【学习目标】154
【必备知识】154
一、植物组织培养的基本理论154
二、组培快繁研究的技术路线155
三、组培试验的设计方法156
四、组培快繁试验方案的制订157
五、组培试验结果观察、数据分析及试验报告撰写158
六、组培快繁技术研发成果应用159
【工作任务】160
任务11药用植物巴戟天组培快繁技术开发试验方案制订160
【项目自测】160
【素质拓展】161
多因子试验161

模块五药用植物组培快繁实例及实训162
项目十二常用药用植物的组培快繁技术162
【学习目标】162
【必备知识】162
【工作任务】162
任务12-1药用根和根茎类植物的组培快繁162
任务12-2药用全草类植物的组培快繁169
任务12-3药用花、果实和种子类植物的组培快繁174
任务12-4药用茎和茎皮类植物的组培快繁181
【项目自测】185

附录187
附录一常用培养基配方187
附录二培养物的不良表现、可能原因及改进措施192
附录三蒸汽压力与蒸汽温度对应表193
附录四乙醇稀释方法，稀酸、稀碱的配制方法193
附录五常用抗生素的配制和贮存194
附录六常用植物生长调节剂的配制和贮存194
附录七植物组织培养常用消毒剂及使用效果194
附录八常用植物生长调节剂浓度单位换算表195

参考文献196