临床分子生物学检验技术实验指导（新版）

　　近年来，随着科学技术的进步，大量先进仪器和技术的采用，医学检验得到飞速的发展。各种新的检验技术不断涌现，对临床疾病的诊疗越来越重要，作用越来越突出，为人类疾病的诊断、治疗监测、预后判断提供大量新的实验室监测指标。据统计，临床实验室提供的医学检验信息占患者全部诊疗信息的60%以上，医学检验已成为医疗的重要组成部分，被称为临床医学中的“侦察兵”。为了更好地适应医学检验技术专业的教学发展和需求，体现新的教学理念和特色，在认真、广泛调研的基础上，在医学检验技术专业教学指导委员会相关领导和专家的指导和支持下，华中科技大学出版社组织了全国40多所医药院校的200多位老师编写了本套全国高等医药院校医学检验专业“十三五”规划教材。

　　广州医科大学 ，教授，主任医师，全国高等医药院校临床生物化学与分子诊断学理事会常务理事、广东省医院协会临床实验室管理专业委员会副主任委员、广东省医师协会检验医师分会常委。

第一章临床分子生物学检验技术实验基本知识/1
第一节临床分子生物学检验技术实验室管理规程/1
第二节临床分子生物学检验技术实验操作基本知识/5
第三节实验操作技能学习要求与考评/9
第二章临床分子生物学检验技术基本技能实验/13
第一节核酸的分离与纯化/13
实验一质粒DNA的提取与纯化/13
实验二基因组DNA的分离与纯化/16
实验三RNA的提取与纯化/19
第二节核酸的鉴定与分析/24
实验四紫外吸收法鉴定核酸的浓度和纯度/24
实验五核酸浓度荧光微量检测/27
实验六核酸片段的琼脂糖凝胶电泳/29
实验七核酸片段的聚丙烯酰胺凝胶电泳/32
第三节聚合酶链式反应技术/35
实验八常规PCR检测方法/35
实验九RTPCR检测方法/39
实验十实时荧光定量PCR检测方法/42
第四节印迹技术/47
实验十一Southern blot技术/47
实验十二Northern blot技术/51
实验十三Western blot技术/54
第五节生物芯片技术/59
实验十四基因芯片/59
实验十五蛋白质芯片/64
第六节核酸测序技术/68
实验十六双脱氧链终止测序法/68
实验十七焦磷酸测序法/73
实验十八高通量测序法/75
第七节生物信息分析技术/82
实验十九引物设计方法/82
实验二十序列比对分析/84
实验二十一分子系统发育分析/86
实验二十二基因功能与通路分析/89
第八节分子克隆技术/93
实验二十三感受态细胞的制备/93
实验二十四DNA重组与转化/95
实验二十五重组子的筛选与鉴定/97
实验二十六重组基因的诱导表达与检测/103
第三章临床分子生物学检验技术综合性实验/108
第一节感染性疾病的临床分子生物学检验/108
实验二十七乙型肝炎病毒(HBV)基因定量检测/108
实验二十八甲型流感病毒(H1N1)基因定性检测/111
实验二十九人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测/115
实验三十结核分枝杆菌的检测/118
第二节遗传性疾病的分子生物学检验/122
实验三十一地中海贫血基因检测/122
实验三十二肌营养不良相关基因检测/127
实验三十三强直性脊柱炎基因检测/130
实验三十四遗传性耳聋相关基因检测/132
第三节肿瘤疾病的临床分子生物学检验/136
实验三十五Her2基因表达水平分析/136
实验三十六EGFR基因突变检测/140
实验三十七白血病融合基因BCRABL的检测/143
实验三十八循环肿瘤细胞检测/146
第四节药物基因的临床分子生物学检验/151
实验三十九华法林代谢基因检测/151
实验四十叶酸代谢基因检测/154
第五节个体遗传标记和染色体异常的临床分子生物学检验/157
实验四十一STR基因座分型/158
实验四十二HLA基因分型/161
实验四十三21三体异常的分子诊断/163
第四章临床分子生物学检验技术创新性实验/168
实验四十四流感病毒分子流行病学分析/168
实验四十五荧光定量PCR高分辨率熔解曲线分析检测
基因点突变/170
实验四十六荧光素酶报告基因的制备/172
附录常用试剂与缓冲液的配制/174
主要参考文献/179
彩图/183