酶工程实验指导

　　全书包括五部分内容，分别为酶学基础实验、微生物发酵产酶实验、酶的提取与分离纯化实验、酶的固定化及分子修饰实验以及酶的应用实验。基本涵盖酶工程领域的基础实验内容。 本书可作为生物技术、生物工程、食品生物技术、生物制药等专业学生的参考用书，也可供相关行业的技术人员参考。

　　王君，滨州学院生物工程学院，副院长，2008年获得南开大学微生物学专业博士学位后，就职于滨州学院生物工程学院、山东省黄河三角洲生态环境重点实验室，主要研究方向为资源细菌及其工程学，在环境中微生物的多样性调查、功能微生物菌种选育、驯化及应用方面取得了多项研究成果。 主持完成国家自然科学基金项目1项，山东省自然科学基金项目1项，山东省高等学校科技计划项目1项，山东省科技发展计划项目1项，滨州学院博士基金及重大研究课题各1项，与企业合作研发项目4项。发表文章SCI、EI及核心期刊文章20多篇，已获得国家发明专利4项。 主讲《酶工程》、《酶工程实验》，积极参与该课程的教学改革中，通过完成校级重点教研课题，搭建开放实验室教学平台，深化酶工程实验教学改革；立项《酶工程实验指导》教材编写项目。近五年，指导本科毕业论文38人次，2次获得省级优 秀学士学位论文指导教师称号。

第一部分 酶学基础实验1
实验一 酶促反应中初速度时间范围测定 1
实验二 pH对酶活力的影响——最适pH的测定 5
实验三 温度对酶活力的影响——最适温度的测定 8
实验四 米氏常数和最大反应速率的测定 11
实验五 抑制条件下Km和vmax的测定及抑制类型的判定 15

第二部分 微生物发酵产酶实验 20
实验六 产淀粉酶菌株的快速筛选 20
实验七 碱性蛋白酶高产菌株的选育 24

第三部分 酶的提取与分离纯化实验 28
实验八 酵母中蔗糖酶的提取及酶活测定 28
实验九 α-淀粉酶的提取及活力测定 32
实验十 酸性磷酸酯酶的提取和酶活力测定 36
实验十一 溶菌酶的制备及活力测定 40
实验十二 大蒜细胞SOD的提取和分离 43
实验十三 离子交换色谱法分离蛋白 46
实验十四 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白 50

第四部分 酶的固定化及分子修饰实验 57
实验十五 蔗糖酶包埋及固定化酶活测定 57
实验十六 尼龙固定化木瓜蛋白酶 60
实验十七 酵母细胞固定化 63
实验十八 胆绿素还原酶的修饰与活性基团的鉴定 66

第五部分 酶的应用实验 69
实验十九 淀粉的糖化及DE值的测定 69
实验二十 酶法澄清苹果汁加工工艺优化 74
实验二十一 酶反应器设计及酪蛋白水解物的制备 76
实验二十二 酶试纸法检测样品中H2O2的浓度 79
实验二十三 邻苯二酚双加氧酶基因在大肠杆菌中的表达 82

参考文献 86

附录 88