分子生物学实验技术

　　《分子生物学实验技术》内容涵盖三个方面：一是基本实验技术，二是基因工程蛋白质药物工程化生产技术，三是现代分子生物学功能实验技术。本书包括基本分子生物学实验技术，并将常用分子生物学方法、科研成果和基因工程药物生产实践融入实验教学中，培养学生分子生物学实验技能、科研创新及工程产业化能力，实用性和指导性强。 本书可以用作生物技术、生物工程、制药工程、生物医学工程等相关专业本科教材，也可供上述领域研究人员参考。

　　刘长霞，北京化工大学生命科学与技术学院，博士。长期从事分子生物学实验教学及科研工作，具有丰富的教学经验。罗施中，北京化工大学生命科学与技术学院，副院长。主要从事生物化工和化学生物学的相关研究工作。发表论文三十多篇，参编专著一本。荣获2013年北京市科技新星，2013年北京市科学技术奖（三等奖。

第1章　核酸分离提取技术1
引言1
第1节碱裂解法提取质粒DNA1
第2节磁珠法提取质粒DNA4
第3节质粒DNA琼脂糖凝胶电泳及其胶回收7
第4节E.coli基因组DNA的提取10
第5节RNA的分离提取14
参考文献18

第2章　PCR及实时荧光定量PCR技术19
引言19
第1节DNA序列的PCR扩增19
第2节实时荧光定量PCR技术测定目标DNA含量24
参考文献40

第3章　基因工程菌的构建与表达产物鉴定技术41
引言41
第1节E.coli感受态细胞的制备、质粒DNA重组与转化41
第2节SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质45
第3节蛋白质的Western印迹分析50
参考文献56

第4章　基因工程蛋白的工程化生产技术57
引言57
第1节基因工程蛋白的原核表达工程化技术58
第2节原核表达基因工程蛋白的分离纯化68
第3节基因工程蛋白的真核表达工程化技术75
第4节真核表达基因工程蛋白的分离纯化82
参考文献88

第5章　基因定点突变、基因敲除及微生物分子生物学鉴定技术89
引言89
第1节基因定点突变技术89
第2节基于RecA同源重组的基因敲除技术94
第3节基于16SrRNA序列分析等相关技术鉴定微生物107
参考文献119

第6章　蛋白质双向电泳、质谱鉴定及结晶技术120
引言120
第1节蛋白质双向电泳120
第2节蛋白质的质谱鉴定131
第3节蛋白质表达、纯化与结晶138
参考文献151

第7章　生物信息学网络资源利用152
引言152
第1节生物信息数据库152
第2节核酸与蛋白质序列分析158
参考文献163

附录164
附录Ⅰ实验报告撰写方法164
附录Ⅱ实验室安全守则165
附录Ⅲ培养基与试剂配制166