酶活检测：高能量筛选，遗传选择以及指纹分析

　　本书系统地介绍了在高通量筛选、遗传选择和酶指纹分析这三个领域中所使用的各种酶活检测方法，涵盖了近年来在酶活检测方面取得的大部分成果。各个章节脉络清晰，或是介绍某一普适检测方法（如琼脂平板法、化学互补法等）在多种酶的活性检测中的应用，或是列举针对某一类重要的酶（如氧化还原酶、蛋白酶等）的多种检测方法。书中对酶活检测方法的介绍非常细致，包括其原理、流程、操作步骤、优缺点等，并给出了大量的相关文献，便于读者深入查阅。 本书由资深专家编著，各个章节由相应领域中杰出的学者或知名公司撰写，多内容、多学科、多角度地介绍了各种酶活检测方法。最值得一提的是，本书还用一章专门展望了检测方法的工业前景，这对于从事学术研究及工业应用的研究者来说都大有裨益。 对于从事酶学研究、药物开发、生物催化、定向进化等相关领域的研究人员来说，该书是一本不可或缺的工具书。同时，该书对化学家、生物化学家以及生物技术工作者也极具参考价值。

暂缺《酶活检测：高能量筛选，遗传选择以及指纹分析》作者简介

引言
酶活检测
第一部分：高通量筛选
第二部分：遗传选择
第三部分：酶指纹分析
其他领域中的酶活检测
如何使用本书
参考文献
第一部分高通量筛选
1根据颜色变化定量检测水解酶的活性和选择性
11概述
12用显色底物的直接检测法
13使用耦联反应的间接检测法——pH指示剂
131综述利用pH指示剂进行定量检测
132应用
133与其他方法对比
14选择性的估算和测定
141无参考化合物的选择性值的估算
142利用参考化合物定量测定选择性（Quick E及相关方法）
143应用
144优势与不足
参考文献
2检测酶对映体选择性的高通量筛选体系
21引言
22基于紫外/可见光光谱的检测方法
221用手性对硝基苯酯的动力学拆分来筛选脂肪酶或酯酶的检测
方法
222基于酶耦联的紫外／可见光的脂肪酶和酯酶检测
223酶法测定对映体过剩
224基于紫外/可见光的酶免疫测定作为测量对映体过剩的一种
手段
225其他基于紫外／可见光的ee检测方法
23使用荧光的检测方法
231基于伞形酮的体系
232用DNA微阵列进行荧光检测
233其他基于荧光的ee检测方法
24基于质谱的检测方法
241使用同位素标记的MS检测方法
25基于核磁共振波谱的检测方法
26基于傅里叶转换红外光谱法的脂肪酶和酯酶检测方法
27基于气相色谱的检测方法
28基于HPLC的检测方法
29基于毛细管阵列电泳的检测方法
210基于圆二色光谱的检测方法
211基于表面增强共振拉曼散射的检测方法
212结论
参考文献
3氧化还原酶的高通量筛选方法
31引言
32各种氧化还原酶的高通量方法
321脱氢酶
322氧化酶
323加氧酶
324漆酶
33小结
参考文献
4检测方法的工业前景
41引言
42化学品定制中一个有效的生物催化剂筛选的先决条件
43基于光谱（紫外/可见光及荧光）的适用于CCM的筛选方法
431基于产物本身光谱性质的光谱方法
432基于产物连续转化的光谱法
44基于常规仪器检测的适应于CCM的筛选方法
441以流动注射式NMR作为高通量筛选酶活的分析工具
442用于高通量筛选酶活的快速LC/MS方法
45结论
参考文献
第二部分遗传选择
5基于琼脂平板的检测
51引言
511酶的定向进化：筛选或选择
512琼脂平板筛选的一般性质
52基于易化筛选的方法
521酰胺酶
522酯酶
523糖苷合成酶
524半乳糖氧化酶
525单胺氧化酶
526P450单加氧酶
527类胡萝卜素的生物合成
528生物素连接酶
53体内选择法
531糖苷合成酶
532预苯酸脱水酶/分支酸变位酶
533萜环化酶
534色氨酸的生物合成
535核糖醇脱氢酶
536内含肽
537氨酰tRNA合成酶
54总结及展望
参考文献
6酶编码基因的高通量筛选和选择
61引言
62高通量筛选和选择的基础
63用噬菌体展示对酶进行高通量选择
64用细胞展示对酶进行高通量选择
65体内遗传筛选及选择
66筛选异源蛋白的表达和稳定性
661引言
662异源表达的筛选方法
663异源表达的定向进化——近期实例
67体外区室化
68双乳液中的IVC
69总结评述
参考文献
7化学互补
71引言
72互补检测法
721引言
722早期的互补检测法
723互补法进行酶学研究
724互补法进行定向进化
73化学互补法的发展
731引言
732三杂交检测法
733化学互补法
74化学互补法的应用
741引言
742酶抑制剂相互作用
743糖苷合成酶的进化
75结论
参考文献
8筛选新酶的分子途径
81引言
82在能培养的微生物中用核酸探针来探测编码酶的基因
821现有知识和应用
822探针技术的缺陷和创新方法的需求
83微生物的宏基因组：一个新的天然产物和酶的源泉
831获得不能培养的生物的多样性：生物群落DNA概念
832拆分代谢功能：BAC策略
833分析宏基因组文库：基于活性和基于序列的策略比较，特殊基因组
的富集以及高通量筛选方法的应用
834宏基因组成果的延续
84总结评述
参考文献
第三部分酶指纹分析
9解脂酶的荧光探针
91引言
92用于酶活检测的荧光底物
921三酰甘油脂肪酶的活性检测
922二酰甘油脂肪酶的活性检测
923胆固醇酯酶的活性检测
924磷脂酶的活性检测
925神经磷脂酶的活性检测
93用于活性酶定量分析和功能酶指纹分析的荧光抑制物
931分析脂肪酶和酯酶
932探测酶的生物物理性质
933基于亲和性的蛋白质组图谱绘制
参考文献
10水解酶的指纹分析方法
101引言
1011一个酶一个底物
1012酶活图谱
1013鉴别微生物菌株的APIZYM系统
102水解酶的指纹分析
1021用荧光和显色底物进行指纹分析
1022用间接显色检测进行指纹分析
1023鸡尾酒指纹分析
103用指纹数据进行分类
1031指纹的表示
1032数据的归一化
1033酶指纹的等级聚类
1034底物相似性的分析
104展望
参考文献
11蛋白酶底物图谱
111引言
112功能性蛋白酶突破肽底物文库
1121基于溶液的肽底物文库
1122基于固体支持物的肽文库的合成与筛选
1123确定蛋白酶底物特异性的基因方法
113大分子底物的鉴定
1131鉴定大分子底物的基因方法
1132鉴定蛋白酶底物的蛋白质组学方法
114结论
参考文献
12阵列上的酶活检测
121引言
122固定化策略
1221共价和非共价固定化
1222定点和非定点固定化
1223肽链/小分子的定点固定化
1224蛋白质的定点固定化
123检测酶活的微阵列方法
1231用蛋白质阵列进行酶活检测
1232用肽/小分子底物阵列进行酶活检测
1233用其他阵列进行酶活检测
124结论
参考文献
中文索引
英文索引