生物化学与分子生物学综合大实验

　　生命科学的迅速发展，使生物化学和分子生物学越来越成为生命科学各领域的重要研究工具。《高等学校教材：生物化学与分子生物学综合大实验》是在多年来为北京师范大学生命科学学院开设生化大实验及分子生物学实验的基础上编写而成。《高等学校教材：生物化学与分子生物学综合大实验》分为前后呼应的两篇，第一篇介绍了有关生物化学和分子生物学的基本实验技术理论，第二篇是学生实验，书后还摘编了对生物化学和分子生物学实验有用的附录。《高等学校教材：生物化学与分子生物学综合大实验》的编写风格简明、实用。编写中突出实验的基础性、技能性和综合性。通过学习每一个基础实验和掌握每一个基本技能，使学生综合进行接近正规科研的实验训练。同时培养学生分析问题、解决问题的能力和研究的思维能力。《高等学校教材：生物化学与分子生物学综合大实验》可作为高等院校生物和医药农林等专业研究生和本科生生物化学和分子生物学实验的指导用书，也可供生物化学和分子生物学有关研究人员、企业技术人员等参考。

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第一篇常用生物化学与分子生物学实验技术及原理
第一章载体1
第二章PCR基因扩增8
第三章DNA重组16
第四章基因分析与检测27
第五章基因表达53
第六章基因突变和蛋白质工程67
第七章层析技术78
第八章电泳技术90
第九章蛋白质的分离纯化101
第十章蛋白质的分析技术108
第十一章酶工程与固定化酶119
第十二章基因工程蛋白的发酵与制备技术126
参考文献132
第二篇学生实验
实验一质粒DNA的提取及其定性定量分析133
实验二大肠杆菌基因组DNA的分离137
实验三PCR法扩增大肠杆菌碱性磷酸酶基因139
实验四质粒DNA与目的DNA的双酶切和连接142
实验五感受态细胞的制备和重组质粒的转化144
实验六重组子的筛选与鉴定147
实验七重组碱性磷酸酶的发酵培养149
实验八发酵产物(碱性磷酸酶)的检测分析151
实验九发酵产物（碱性磷酸酶）的分离纯化155
实验十碱性磷酸酶分离纯化参数的测定157
实验十一碱性磷酸酶的纯度鉴定及其亚基分子量测定159
实验十二碱性磷酸酶的酶学性质分析162
实验十三碱性磷酸酶的变性及复性作用研究166
实验十四碱性磷酸酶的固定化及固定化酶的特性研究169
实验十五碱性磷酸酶的定点突变（PCR法）172
实验十六碱性磷酸酶及其突变体的结构与功能研究175
附录
一、常用单位及换算方法179
二、常用核酸、蛋白质换算数据179
三、氨基酸符号及相应密码子180
四、常见市售酸碱的浓度及近似pH值180
五、硫酸铵饱和度的常用表181
六、离心机转速与相对离心力的换算183
七、层析法常用数据185
八、常用的电泳缓冲液及凝胶加样缓冲液191
九、常用限制性内切酶酶切位点及缓冲液192
十、分子生物学常用缓冲液和试剂的配制193
十一、生化常用缓冲液的配制196
十二、常用细菌培养基和抗生素溶液199
十三、小鼠腹水多克隆抗体的制备和检测202