实用膜片钳技术

　　本书从实际应用的角度出发，具体介绍了膜片钳技术的基本概念、方法及实验技巧，同时还详细介绍了美国Axon公司（现MolecularDevices公司）生产的膜片钳实验仪器与采样软件pClamp的使用方法，对膜片钳实验中常见的一些问题也进行了细致解答。本书共计5章，包括膜片钳技术基本概念、膜片钳技术实验方法、脑片膜片钳记录技术、膜片钳放大器及数模/模数转换器、膜片钳技术应用软件。此外在附录中还介绍了目前膜片钳放大器的常用类型及性能特点。本书的一大特色是内容侧重经验性、技巧性的介绍，实用性很强。.本书非常适合作为从事膜片钳技术的科技工作者（包括实验室技术人员、大专院校和科研院所的硕士、博士研究生等）的实验指导参考书，也可作为膜片钳技术的培训教材，还可作为生理学、神经科学、细胞生物学等相关专业的科研人员学习膜片钳技术的入门书籍。另外，本书还可为实验室购买膜片钳放大器提供参考，对从事膜片钳实验设备的市场营销人员也具有一定的参考价值。...

　　刘振伟，医学博士，1966年出生，黑龙江省大兴安岭人。1991年毕业于北京医科大学临床医学专业。一直从事神经生理学和神经药理毒理学研究，研究工作“中枢抗胆碱药三环哌酯对海马神经元烟碱受体及突触传递的阻断作作”曾获得第五届中国药理学会Servier奖。2003至2006年赴澳大利亚西澳大学和昆士兰大学工作，主要进行机械敏感性离子通道门控机制方面的研究。现任军事医学科学院副教授，从事神经药理学与神经毒理学研究。国家自然科学基金同行评议专家，中国药理学会 、澳大利亚生物物理学会会员。

第一章 膜片钳技术基本概念
第一节 膜片钳技术概述
一、什么是膜片钳技术
二、膜片钳技术的发展概况
三、膜片钳技术的基本记录模式
四、膜片钳技术的应用
第二节 膜片钳记录系统中的电极
一、玻璃微电极
二、Ag/AgCl电极
三、Pt电极
四、碳纤电极
五、常见问题
第三节 膜片钳记录系统中的电压和电位
一、膜电位
二、平衡电位
三、命令电压
四、钳制电位
五、电极电压降
六、失调电位
七、浴池电位
八、常见问题
第四节 膜片钳记录系统中的电流和电导
一、跨膜电流
二、离子通道电导
三、闸门电流
四、正电流与负电流
五、内向电流与外向电流
六、去极化电流与超极化电流
七、封接电流
八、输入漏电流
九、膜漏电流
第五节 膜片钳记录系统中的电阻
一、膜电阻与膜输入阻抗
二、电极电阻
三、封接电阻
四、串联电阻及接入电阻
五、浴池电阻
六、漏电阻
第六节 膜片钳记录系统中的电容
一、膜电容
二、分布电容
三、电极电容
四、快电容与慢电容
五、时间常数
第七节 膜片钳记录系统中的漏减功能
一、漏电流的概念与特点
二、Clampex采样软件的P/N漏减功能
三、Clampex采样软件的定标P/N漏减功能
四、膜片钳放大器漏减功能
五、Clampfit处理软件的漏减功能
六、常见问题
第八节 膜片钳记录系统中的噪声
一、噪声的测量指标
二、噪声的基本类型
三、膜片钳放大器噪声
四、电极夹持器噪声
五、电极噪声
六、干扰的来源
七、干扰的排除方法
八、量化噪声
九、混叠噪声
十、常见问题
第九节 膜片钳记录系统中的信号滤波
一、有关滤波的几个基本概念
二、滤波器的基本类型
三、数码滤波器
四、采样频率与滤波频率的关系
五、电干扰滤波器
六、常见问题
第二章 膜片钳技术实验方法
第一节 全细胞记录技术
一、离子通道简介
二、全细胞记录要注意的问题
三、全细胞记录与其它记录技术的比较
四、电压门控性离子通道的动力学研究
五、配体门控性离子通道的动力学研究
第二节 单通道记录技术及其数据分析
一、单通道记录模式
二、单通道数据的采集
三、单通道数据分析中的几个基本概念
四、单通道数据分析前的处理
五、单通道事件的检测
六、单通道电流幅度（电导）的分析
七、单通道开关的动力学分析
八、通道开放概率的计算
九、膜片上通道数目的估算
十、其它分析
第三节 穿孔膜片钳记录技术
一、穿孔全细胞记录模式
二、穿孔囊泡记录模式
三、穿孔膜片钳记录模式的实验方法及注意事项
第四节 巨膜片记录技术
一、巨膜片记录技术的概念
二、肌细胞标本制备
三、玻璃微电极制备
四、封接的形成
五、巨膜片电容的测定
六、巨膜片记录技术的局限
第五节 其它膜片钳技术方法
一、膜电容测定法
二、松散封接记录技术
三、脂质体记录技术
四、细胞内膜离子通道记录技术
五、细胞内灌注与抽吸技术
六、压力钳技术
七、在体膜片钳记录技术
第三章 脑片膜片钳记录技术
第一节 脑片膜片钳技术研究概况
一、脑片标本介绍
二、脑片膜片钳技术研究概况
第二节 脑片培养技术
一、脑片培养技术简介
二、脑片培养方法
三、培养海马脑片的特点
四、脑片培养的应用
第三节 海马的结构
一、海马的概念
二、海马结构的细胞构筑
三、海马结构的主要传出纤维
四、海马结构的主要传入纤维
五、海马结构的内部纤维联系
第四节 脑片振动切片机
一、脑片切片方法简介
二、NVSLM1型振动切片机
第五节 海马脑片盲法膜片钳记录技术
一、实验设备
二、溶液配制
三、海马脑片制备
四、脑片孵育槽
五、脑片记录浴槽
六、玻璃微电极制备
七、脑片盲法全细胞记录
第四章 膜片钳放大器及数模/模数转换器
第一节 Axoclamp 2B微电极放大器
一、探头
二、电极夹持器
三、模型细胞
四、前后面板
五、浴池电位的去除
六、记录模式
七、接地和交流噪声
八、电源
九、常见问题
第二节 Axopatch 1D膜片钳放大器
一、探头
二、电极夹持器
三、模型细胞
四、前后面板
五、噪声
六、电源
七、仪器的基本连线
八、全细胞与单通道记录操作步骤
九、常见问题
第三节 Axopatch 200B膜片钳放大器
一、探头
二、电极夹持器
三、模型细胞
四、前后面板
五、接地和交流噪声
六、电源
七、全细胞与单通道记录操作步骤
八、常见问题
第四节 Digidat 1200系列数/模和模/数转换器
一、Digidata 1200系列转换器之间的差别
二、Digidata 1200B前后面板
三、安装
四、pClamp采样软件对Digidata 1200系列转换器的确认
第五节 Digidat 132x系列数/模和模/数转换器
一、Digidata 132x系列转换器之间的差别
二、所需计算机配置
三、前后面板
四、安装
五、pClamp采样软件对Digidata 1200系列转换器的确认
六、常见问题
[附] 什么是SCSI？
第五章 膜片钳技术数据采集和处理软件
第一节 pClamp数据采集和处理软件概述
一、pClamp简介
二、pClamp的构成
三、pClamp的安装和运行
第二节 Clampex 8数据采集软件
一、几个名词术语
二、Clampex 8主要文件类型
三、Clampex 8采样文件的命名
四、Clampex 8的窗口
五、Protocol编辑
六、Configure设置
七、Lab Bench设定
八、Seal Test功能
九、Membrane Test功能
十、液接电位的计算与钳制电位的校正
十一、常见问题
第三节 Clampfit 8数据处理分析软件
一、Clampfit 8的窗口
二、Clampfit 8文件类型
三、数据的基本处理功能
四、Stimulus Waveform调节
五、快速作图
六、文件的数学运算
七、拟合
八、统计分析
九、常见问题
第四节 Clampex 9数据采集软件
一、Clampex 9采样及分析窗口
二、Protocol编辑
三、Resistance Test功能
四、LTP助手（LTP Assistant）
五、Telegraphed Instrument设置
六、常见问题
第五节 Clampfit 9数据处理分析软件
一、Clampfit 9的窗口
二、Clampfit 9文件的数学运算
三、Clampfit 9的单通道数据分析功能
四、Clampfit 9的自发突触活动分析
五、Variance-mean分析（V-M分析）
六、Clampfit 9的阈值检测功能
七、常见问题
第六节 Origin数据分析与图形制作软件
一、如何将pClamp采样数据输入到Origin软件进行处理
二、如何赋予数据表中各组别的名称与特征
三、如何对数据表中的数据进行转换
四、作直条图时的几个问题
五、如何对数据进行直线回归
六、如何对坐标轴进行调整
七、如何对坐标轴做断轴
八、如何将几个不同的图显示在同一页面上并进行处理
九、如何对所获数据进行曲线拟合
十、如何制作Waveform图形
十一、如何在Origin中剪切输入的采样图形
十二、如何去除坏点
十三、如何将制作好的图形输出
附　录
附录一 膜片钳技术常用单位及换算
附录二 膜片钳实验溶液中常用离子的化合价与迁移率
附录三 膜片钳放大器的主要类型及生产厂家
附录四 膜片钳技术推荐参考书
图题与表题
一、图题
二、表题
索引
一、中文索引
二、英文索引