蛋白质纯化与鉴定实验指南

　　为适应生命科学发展的需要，自1989年以来，著名的美国冷泉港实验室每年举办一期"蛋白质纯化与鉴定研习班"，本书即是在其讲稿的基础上形成的。全书分4个单元，分别以钙调蛋白、转录因子AP-1、重组和胰岛素受体为例，从不同的原材料出发，通过一组具有代表性的并经多年优化的纯化和鉴定实验，具体地介绍现代生物学和医学实验室中一系列常用的蛋白质纯化与鉴定技术;对每个实验均详细叙述其材料设备、试剂配制、操作程序和注意事项等。书后附录对若干重要的通用技术作了补充介绍。本书可供分子生物学、细胞生物学、微生物学、生物化学、遗传学，以及医学、农学等领域的科研和教学人员参考，是实验室的必备工具书。

暂缺《蛋白质纯化与鉴定实验指南》作者简介

序
前言
绪论
如何使用本指南
第1单元钙调蛋白的纯化
实验1活性测定：钙调蛋白组分的活性测定
实验2组织提取物的制备
实验3粗分级分离
实验4离子交换层析
实验5疏水作用层析
实验6钙调蛋白的鉴定：收率的计算
实验7钙调蛋白的鉴定：电泳
实验8蛋白质的裂解消化
实验9反相高效液相色谱
实验10钙调蛋白的物理分析
实验11钙调蛋白的化学分析
试剂的配制
第2单元Hela细胞转录因子AP-1的纯化
实验1Hela细胞核提取物的制备
实验2SephacryS-300HR凝胶过滤层析
实验3序列特异性DNA亲和层析
实验4DNA酶I足迹分析
实验5凝胶迁移变动分析
实验6肝素-SepharoseCL-2B的制备
试剂的配制
参考文献
第3单元大肠杆菌中过表达重组蛋白的纯化
实验1大肠杆菌细胞的破碎和包涵体的配制
实验2包涵体沉淀的溶解.重折叠和离子交换层析
实验3可溶性提取物的聚乙烯亚胺沉淀和免疫亲和层析
实验4定量测定与制备小结
实验5蛋白质的鉴定
方案补充实验：从过表达细菌提纯
试剂的配制
参考文献
第4单元鼠肝胰岛素受体的溶解与纯化
实验1大鼠肝脏质膜的分离
实验2膜胰岛素受体的溶解
实验3溶解受体的凝集素亲和层析
实验4部分纯化受体的胰岛素亲和层析
实验5胰岛素受体与胰岛素的交联
实验6胰岛素激素的胰岛素受体自磷酸化
实验7胰岛素受体糖基化的分析
试剂的配制
参考文献
附录
附录1pH的测量
附录2缓冲液的配制
附录3电导率的测量
附录4固态硫酸铵法分级分离
附录5蛋白质的SDS-PAGE电泳
附录6蛋白质的过甲酸氧化
附录7用亚氨基二乙酸Sepharose6B分离磷酸肽
附录8蛋白质内序分析用肽段的分离与纯化
附录9推荐读物
技术索引
主题索引