巴别塔事件后，示拿人分散到各地。有一个名叫亚伯兰的闪族人，被耶和华选中，要他代替耶和华在世上行道。耶和华叫亚伯兰离开闪族往南迁移，亚伯兰受到指示后，即扶老携幼，经示剑、伯利特，辗转埃及，又迁到迦南的幔利橡树林定居。99 岁那年，耶和华令亚伯兰改名亚伯拉罕，从此亚伯拉罕家业大兴，并与其妻生一儿子，取名以撒，爱之如掌上明珠。但造化弄人，有一天，耶和华突然降灵亚伯拉罕，要他牺牲爱子以撒献祭给耶和华。
这要求的确残忍，但笃信耶和华的亚伯拉罕甘愿忍受，他带了孩子和祝祭的器具到摩利亚山行祭礼。可怜的以撒还问父亲为何不带祭品，哪知他自己就是祭品！父子俩到了摩利亚山，做好一切祝祭准备，亚伯拉罕就将儿子放在柴堆上，正要动刀杀祭，突然传来一声晴天霹雳，天使出现，拉住亚伯拉罕的手，不准他杀子，并告知这是耶和华对亚伯拉罕的试探，看他是否真的信神。
耶和华对亚伯拉罕的试探，几乎超出亚伯拉罕所能忍受的最大限度，因此也证明了他的忠诚。从此，耶和华就正式授命亚伯拉罕担任他在世上的代理人，诸如大卫、所罗门等《旧约》上的先知、英雄都是他的后代。耶稣也是他第52 代的后辈约瑟的儿子。
在宗教画中，以亚伯拉罕为题材的画并不多，但试探亚伯拉罕一题却很重要。不少画家以此为题留下了著名的作品。据说意大利的雕塑家们于1401 年曾举行过一次《亚伯拉罕献祭以撒》的浮雕创作比赛，参加比赛者七人，比赛结果，是当时还十分年轻的雕塑家吉贝尔蒂和著名的建筑艺术家布鲁内莱斯基双双获得最高荣誉。
