他最后的一封信，是于1896年12月7日在意大利的圣雷莫写给索尔曼的。
信末尾的几句话是：
不幸的是，我的健康状况再次恶化，连写这几行字都有困难。但是，一旦康复，我会尽快地回到我们俩都感兴趣的课题上。
您忠实的朋友阿尔弗莱德·诺贝尔
他的笔迹像往常一样，清晰易认，看不出他当时正处于崩溃的时刻。这封未寄出的信，直到他去世后，仍旧放在他的写字台上。
诺贝尔写完这封信后的几小时，便出现了脑溢血的先兆。仆人将他从书房抬到别墅三楼的卧室里，并请来了他的意大利医生。医生立即命令他卧床休息，可是很难做到，此时病人往往极度不安，只有强行让他卧床。他身边的老仆后来回忆说，诺贝尔当时已不会说话，只能用他的母语含糊其词地说一些没有人能够明白的话。他们似乎只听懂了“电报”这个词，于是给诺贝尔的两个侄子，以及索尔曼拍了电报。
经过奋力抢救，终于无效。诺贝尔离去了，永远离去了。时为1896年12月10日，凌晨2时。
他的周围只有雇用的仆人，却没有一个亲人。
在诺贝尔的灵柩旁边，牧师发表了演说。节录如下：
诺贝尔有着永不满足的精神，为此，他牺牲了许多世人所追求的安逸。这里，是他尘世生活的灵光突然熄灭的地方，也是今天为他举哀的场所。
大量赞美之词，很快穿过诺贝尔的灵柩。人们回忆他非凡的智慧，卓越的成就，帮助人类征服自然的神奇才能。他为远方的祖国赢得了荣誉，名扬四海。他为促进文化，解除贫困，贡献了大量来之不易的钱财。他热爱研究的敏锐才干，始终以探索人类力所能及的最大范围为目的。
……
在诺贝尔别墅，举行了短暂的告别仪式之后，铺盖着鲜花的灵柩被运送回国。
后来，诺贝尔基金会将诺贝尔的逝世纪念日——12月10日，定为每年在斯德哥尔摩等地同时举行诺贝尔奖授奖仪式的日期。
伟大的遗嘱
诺贝尔依靠他自己的发明，科技开发，创办企业，不断开拓市场，最终积累了大量的财富，成为一个大企业家。1896年，诺贝尔去世时，他在20个国家拥有诺贝尔总公司，大大小小的工厂几百个。
1896年，93家工厂生产的各型炸药总产量为66500吨，产值大约为1亿瑞典克朗。
诺贝尔留下的财产达3300万瑞典克朗。诺贝尔生前谈到私人财产的继承问题时，曾经说道：
我特别认为，大宗遗产不过是件阻碍人类才能发展的祸事。一个拥有财富的人，只应将小部分财产付与和他有关系的人。至于子女，如果除去必需的教育费用，另外还留给他们许多钱财，我认为是错误的，这不过是在奖励懒惰。这样做的结果，将会阻碍自己的子女发展他们个人的独立才干。
诺贝尔生前，曾经先后立过三次遗嘱。
第一次是在1889年。
这年，他的母亲谢世，上一年他的二哥路德维希辞世。这段时间是诺贝尔最感痛苦的时期。
第二次是1893年3月14日。
根据这份遗嘱，诺贝尔遗产的20%是赠给他的亲属和朋友的，共计23人。10%赠给奥地利和平同盟，同时，斯德哥尔摩大学、斯德哥尔摩医院和卡罗林医学院各得遗赠5%。剩余部分移交给瑞典皇家科学院，设立奖励基金。
他说道：
建立这种基金的目的，旨在由瑞典皇家科学院每年将其利息作为一种奖金，颁发给最重要的、最有独创性的发现，或知识和进步的广泛领域内的理论性成就，生理学和医学除外——这方面的奖由卡罗林医学院颁发。我并没有将此作为一种绝对的条件……我确切的愿望是，我在遗嘱中的全部奖金，将授予最值得奖励的男人或女士，而不论其是瑞典人还是外国人。
